检测在非洲猪瘟的防控中扮演着至关重要的角色。然而，采样的科学性和规范性不仅关系到检测结果，还可能影响猪场的安全。2020年，国家发布了《非洲猪瘟诊断技术》国家标准（标准编号：GB/T18648-2020），该标准由国家市场监督管理总局和国家标准化管理委员会于2020年12月14日正式发布并实施。该标准涵盖了生物安全措施、临床诊断、实验室样品采集与处理、荧光定量PCR等多种方法以及综合判定等关键内容。

一个完整的非洲猪瘟病原荧光定量PCR检测流程一般包括：样品采集及保存、样品前处理、核酸提取与配液、实时荧光定量PCR扩增反应以及检测结果的导出与分析。从实验流程来看，样本的正确采集和运输是确保实验室检测结果准确性的首要因素。对于如何有效地进行样品采集、处理和保存尤为重要。

临床样品的采集及处理注意事项

以下是根据《非洲猪瘟诊断技术》国标和2010年颁布的《非洲猪瘟检疫技术规范》（标准编号：SN/T1559-2010）总结的临床样品采集及保存运输的重点内容：

#01 抗凝血（全血）

采集方式：使用含有抗凝剂（EDTA-紫色盖）的无菌管（真空采血管）从颈静脉、下腔静脉或耳缘静脉抽取5ml全血。如动物已死亡，可从心脏处采血，但需立即进行。样品需冷藏运输，送达检测实验室后，可选择在-70℃冷冻保存。注意：切勿使用肝素（绿色盖子）的无菌采血管，此会抑制PCR反应，容易导致假阴性结果。

#02 血清

采集方式：使用未加抗凝剂的真空采血管从颈静脉、下腔静脉或耳缘静脉抽取5ml血液样品。建议在4℃下放置14-18小时以分离血凝块，去除凝固物后离心10-15分钟，回收澄清的血清。血清样品在分离后可立即检测，也可冷藏运输，送达实验室后，选择在-70℃冷冻保存。注意：若血清为红色，已发生溶血，则无法用于ELISA检测。

#03 器官和组织样品

采集目标：主要是脾脏、淋巴结、扁桃体、肾脏等，其中脾脏和淋巴结通常含有最高的病毒量。样品需冷藏运输，并尽快送至实验室。如无法及时送检，可将样品储存在冷库或液氮中。可用10%缓冲福尔马林浸泡30分钟以上来灭活病毒后再进行PCR检测。

#04 软蜱

采集方式：收集软蜱时，尽量保持蜱的存活以确保内部病毒保存完好，防止DNA降解。可将钝缘软蜱放入螺旋盖样品瓶中，添加少量土壤，并用纱布内衬，保持常温运输。到达检测实验室后，样品需在-70℃冷冻保存或置于液氮中；若仅进行形态学观察，可放入100%酒精中保存。注意：其他昆虫如蚊子、苍蝇等也需尽量保持存活送检，或直接储存在液氮中。

#05 环境样品

采集方法：可多样化收集环境拭子，如粪便、泔水、饲料等，并保持在4℃保存。

#06 唾液及拭子样品

采集唾液：使用棉绳或纱布固定在栏杆处，待猪自然咀嚼后，收集挤出的液体并存入干净的试管或自封袋内，密封并冷藏保存。鼻拭子采集：使用无菌棉签，以45°角插入猪鼻腔3-5cm，轻轻旋转3-5次以刺激喷嚏反射，待棉签湿润后保存至洁净的试管中，密封低温冷藏运输。肛门拭子：使用浸湿生理盐水的无菌棉签插入猪肛门2-3cm，轻轻旋转后独立分装至洁净的试管或密封袋内，冷藏运输保存。

样品保存和运输

为确保检测结果的准确性，样品应在采集后尽快送往指定实验室进行检测，优先选择次日到达的物流方式，并采用冷链运输，以防止样品降解失效。选择新葡萄8883官网AMG作为您的合作品牌，保障您的检测需求与安全性。