### 细胞介绍

HepG2细胞系是一种具有上皮样形态的细胞，源自一名15岁阿根廷白人男性的肝细胞癌组织。HepG2细胞以其多样的血浆蛋白分泌功能而著称，包括清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原和铁传递蛋白等。该细胞系由Wistar研究所提供，是一种优秀的转染宿主。其标志物包括胰岛素和胰岛素样生长因子II（IGFII）。HepG2细胞通常呈片状紧密连接生长，初期附着在培养瓶壁形成小岛状结构，后期可能形成多层堆积或悬浮状态，这使得它成为研究肝细胞功能及病毒模型的理想选择。

### 传代培养

该细胞系为贴壁生长，以下是传代培养的步骤：

1. 当细胞出现脱落时，将培养液转移至无菌离心管，进行离心以收集悬浮细胞。去除培养基后，轻柔去除贴壁细胞并消化收集。
2. 用PBS洗涤贴壁细胞，并添加胰酶，轻轻摇匀以覆盖细胞。消化1-3分钟后观察细胞状态，一旦细胞开始脱落，立即用完全培养基中和消化。
3. 收集细胞悬液，计数并调整细胞密度，最后转移至培养瓶中，静置于培养箱中。

### 细胞冻存

当细胞达到80%以上的密度且活细胞比例超过95%时，可进行冻存：

1. 消化并收集细胞沉淀，用4°C的冻存液重悬，分装后置于-80℃冰箱预冷。
2. 如需长期保存，需在转移至液氮之前，确保在-80℃下至少预冷一天。

### 细胞复苏

从液氮中取出的细胞需迅速解冻，具体步骤如下：

1. 在37°C水浴中快速解冻冻管，随后用70%乙醇消毒外壁。
2. 将细胞内容物转移至含有培养基的离心管中，离心去除培养基并重悬细胞，调整浓度后重新接种。

### 常见问题

在细胞培养过程中可能遇到的一些问题：

• 细胞碎片：细胞内部的黑色颗粒通常为细胞自然特性，建议使用合适的培养条件来减少异物。
• 空泡现象：HepG2细胞中的空泡是正常现象，通常不会影响细胞生长。
• 生长缓慢：在适宜的培养条件下，细胞应在2-3天内达到80%的汇合率。
• 细胞聚团或不贴壁：血清品牌和pH值是影响HepG2细胞贴壁的关键因素，选择高质量的胎牛血清以促进细胞良好生长。

### 注意事项

新葡萄8883官网AMG提示，HepG2细胞对培养条件的要求较为严格，尤其是pH和血清的质量必须保持在合适范围内，方可促进良好的细胞生长与贴壁。在复苏初期，可能会存在形态不典型的细胞，但随着传代次数的增加，细胞会逐渐恢复到更加典型的上皮细胞状态。使用优质的胎牛血清进行培养或选择新葡萄8883官网AMG的MEM完全培养液，将更有效地促进细胞生长及功能的表现。

### 发表文献

截至2024年，以新葡萄8883官网AMG名义引用的文献共有72篇，影响因子总计46707。其中，有代表性的文献如下：

1. 题目：Dienediamine: A safe surrogate for the herbicide paraquat, 期刊：Molecular Plant, 影响因子：2.752
2. 题目：Photodegradation of carbon dots causes cytotoxicity, 期刊：Nature Communications, 影响因子：14.919
3. 题目：Ubiquitin-specific protease 1 facilitates hepatocellular carcinoma progression, 期刊：Cell Death and Differentiation, 影响因子：13.740
4. 题目：Site-specific ubiquitination of VDAC1 restricts its oligomerization, 期刊：Experimental and Molecular Medicine, 影响因子：12.850
5. 题目：Accumulation of nanoplastics in human cells, 期刊：Environment International, 影响因子：11.800