细胞简介

该细胞系源自一名1岁男孩的外周血，患有急性单核细胞性白血病。该细胞系具有吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力，细胞膜和胞浆内未检测到免疫球蛋白，并且表达C3R和FcR。细胞能够在佛波酯TPA的诱导下向单核系方向分化，适合作为转染宿主。

细胞信息

细胞名称：Thp-1人单核细胞白血病

生长特性：悬浮状态，低密度下容易聚团，而在高密度时则能分散。倍增时间为60-70小时（PubMed=6970727）；26小时（PubMed=25984343）；以及约35-50小时（DSMZ=ACC-16）。换液频率为每周2-3次，传代比例为1:2-1:4（具体情况依据实际细胞量而定）。在8×10⁶/ml密度下进行传代，细胞密度不应超过1×10⁶/ml。

培养基推荐配方：

RPMI-1640（货号：ZQ-200）+10%胎牛血清（货号：ZQ0500）+1%双抗（货号：CSP006）+β-Mer，终浓度为0.05mM（货号：CSP005，500ml添加500μl）。

β-巯基乙醇（β-Mer）是一种常用的培养补充剂，具有抗氧化特性，有助于降低氧化应激对THP-1细胞的影响。在细胞密度较高时可适当提高其比例，但不超过标准量的15倍。

THP-1细胞复苏

THP-1细胞复苏后通常需要3-5天的恢复时间，细胞的生长密度有一定依赖性。如果在复苏时去除了冻存液，建议复苏后48小时内不进行操作。当细胞密度较低时，细胞往往呈团生长，这是细胞快速增殖的正常现象。

THP-1细胞的传代

A、THP-1细胞为悬浮细胞，具有低密度依赖性，当细胞密度达到8×10⁵个活细胞/mL时需要进行传代。细胞密度不应超过1×10⁶个活细胞/mL。

B、传代比例一般为1:2-4，分瓶后可直接补充培养液，无需离心。对于T25培养瓶，可添加新鲜完全培养基至7ml。

C、如对悬浮细胞的密度控制不佳，建议进行细胞计数。

D、培养大约一周后，可以进行1次离心，以去除部分死细胞。

THP-1细胞的冻存

A、可使用10%DMSO：900μl FBS+100μl DMSO（注意安全操作，DMSO有毒），或直接使用无血清细胞冻存液。

B、收集生长状态良好的细胞于15mL离心管中，调整细胞浓度至200万-300万/mL进行冻存。

C、根据情况可放入-80℃培养箱，最多保存3个月，尽快转移至液氮中进行长期保存。

THP-1培养常见问题

1. THP-1细胞在培养过程中出现细胞聚团，应如何处理？

少量细胞聚团（如葡萄串状）属于正常现象，尤其在低密度时尤为明显。高密度时细胞应自然分散；如聚团严重，可通过观察细胞状态、调整β-巯基乙醇的添加量、更换血清品牌，或提高血清比例（不超过20%）来改善。

2. THP-1细胞培养过程中出现细胞贴壁，该如何应对？

少量细胞贴壁是正常现象，无需担心。可轻吹收集自由悬浮细胞，或丢弃贴壁的细胞。但如果贴壁细胞比例超过20%，则需要排查培养箱的温度和CO₂浓度，检查培养基的成分以及培养器皿是否存在异常，非TC处理过的培养瓶有助于避免细胞贴壁问题。

3. THP-1复苏不成功，应该怎么办？

该细胞冻存后复苏率较低，冻存时应酌情增加细胞量，活细胞密度不应低于100万-300万/mL。此外，细胞复苏后需等待3-5天恢复状态。如有细胞碎片，可待细胞密度增大后通过低速离心去除。由于此细胞系为悬浮细胞，培养时应尽量避免频繁离心。换液时请注意不要完全更换培养基。

提示：THP-1细胞培养中需加入β-巯基乙醇，确保现用现配，不可长期储存以免影响稳定性。

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