描述：甘油是甘油三酯水解后的产物，作为游离脂肪酸的对应物，其含量可以作为甘油三酯水解反应的可靠检测指标，但其检测过程更为便捷。新葡萄8883官网AMG推出的试剂盒经过优化，能够有效检测实体组织和细胞中的甘油含量，其线性检测范围为10-1200µmol/L。

原理：在ATP的促进下，甘油经过甘油激酶的磷酸化反应生成3-磷酸甘油，随后被甘油磷酸氧化酶氧化，产生过氧化氢。在过氧化物酶的催化下，生色底物转化为苯穗亚胺，其光密度值与甘油浓度成正比。

适用范围：本试剂盒适用于测定实体组织和细胞中的甘油浓度。其组成部分包括（可进行105次微板或30次1ml比色杯测定）：(1) 裂解液50ml (2) R1试剂16ml (3) R2试剂4ml (4) 4mmol/L甘油标准品1ml，储存于4ºC下可有效保存6个月。

所需设备：进行此检测需使用酶标仪、生化分析仪或721、722型可见光分光光度计。最佳工作波长为550nm，如没有此波长则建议优先选择570nm，次选530nm或490nm。

样品处理：组织细胞裂解可以通过消化和离心来收集细胞，也可以直接在培养皿内进行。一般情况下，6孔板单孔约需2x10⁶个细胞，75cm²瓶可使用约1x10⁷个细胞。按比例为每1~2x10⁶个细胞加入0.1ml裂解液，震荡或涡旋后静置10分钟。如处理动物组织，需在新鲜组织被剪切并称重后再进行保存，避免存储导致的测量误差。

裂解液处理：1. 取适量上清液转移至15ml离心管，接下来的步骤则在此管中进行。剩余裂解液可用于BCA法定量蛋白质或在-20ºC下储存。2. 270ºC加热10分钟以灭活脂肪酶，可能会出现沉淀。3. 在室温下以5000rpm离心5分钟，上层清液可用于酶学测定。

工作溶液配制：按照4:1的比例混合4ml的R1试剂与1ml的R2试剂，立即使用或在4ºC下保存不超过1天。如有变色请弃去。

标准品稀释：可用蒸馏水、生理盐水或与样品缓冲液一致的液体对4mM甘油标准品进行逐步稀释，制得浓度为1000、500、250、125、625、3125、15625、78125µmol/L的溶液，通常取其中的4~6管确保设置0浓度对照反应管。

甘油测定步骤如下：1. 根据下表加样，待测样品体积为10µl，过量可能会抑制反应。2. 在237ºC或25ºC下反应10分钟。3. 反应平衡后，所得颜色在60分钟内应保持稳定。4. 先用蒸馏水和工作液调零，然后测定各管的OD值，最后绘制标准曲线并计算甘油浓度。

附Excel作图步骤：各标准管OD值作为y轴，标准品浓度作为x轴。（1）使用鼠标圈住数据，选择图表向导，选择“散点图”，然后点击“完成”。（2）右键点击图上某一点，采用添加趋势线功能，勾选“显示公式”和“R²值”。5. 以每mg蛋白浓度或细胞数校正甘油含量。