### 培养基倾注温度小常识
在生物医疗实验中,培养基的倾注温度至关重要。以下是一些关键的指导原则:
#### 适宜温度
培养基倾注的最佳温度约为45℃。在进行温度判断时,可以将培养基放置于手掌心,若感到温暖但放置于手背时感到烫手,这表明温度接近45℃。如果倾注时温度过高,可能导致凝固时间延长,并且皿盖上会产生大量冷凝水,这会影响后续实验效果;温度过低则容易在倒板过程中出现琼脂部分凝固的情况。
#### 添加成分
在某些情况下,培养基需要添加其他成分。为避免冷的液体影响琼脂的凝结,建议这些添加成分在加入前先放置至室温。
#### 静置时间
在灭菌后,多数实验室将培养基置于水浴或烘箱中使用。静置时间不宜超过4小时,以防琼脂出现少量凝固及絮状析出现象。
#### 平板准备
倒皿前,确保平皿温度在35℃至40℃之间。如果需要进行表面接种,平板表面有冷凝水时容易造成菌落扩散。可以将平板放置在有对流的无菌净化台中轻轻吹干,但要避免过度干燥,以免平板开裂。
#### 倾注量
推荐的平板倾注量一般为18至20 mL。如果培养时间超过48小时或培养温度高于40℃,应倾注约25 mL,以减少水分过度蒸发的风险,防止平板开裂。
#### 避免气泡
在倒平板时,需尽量贴近平皿壁缓慢倾注,以将气泡留在容器底部。如平板中产生少量气泡,可以轻轻摇动使其移至平皿壁上,不会对观察结果产生影响。
#### 混合均匀
每个平板中应加入10 mL已融化的琼脂培养基,并快速进行往复摇动与旋转,持续5至15次,以确保培养基与接种物充分混合。
#### 培养条件
待平板冷却后,翻转并置于适宜温度下进行培养。
在整个过程中,应注意防止污染。使用前需将装有培养基的瓶子或试管旋松,再置于滚水或蒸汽浴中加热溶解,同时要小心避免培养基的过热与变质。确保消毒后的培养皿数量比样品数量多一个,以用作空白对照。
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